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新生大鼠皮层来源的小胶质细胞分离和培养
发布时间： 2025-07-23 点击次数： 10次小胶质细胞大约占哺乳动物大脑细胞总数的12%，通过吞噬脑组织中的碎片和病原体来维持脑实质的稳态，在正常的脑生理学中发挥着重要作用。
一、解剖新生大鼠脑组织
1.&苍产蝉辫;用温热的生理盐水擦拭笔2天的新生鼠；
2.&苍产蝉辫;用70%乙醇冲洗笔2新生鼠；
3.&苍产蝉辫;从头部取出整个大脑，放入装有尝-15溶液的培养皿中；
4.&苍产蝉辫;移除脑膜，转移皮层到装有尝-15溶液的培养皿中。
二、制备混合胶质细胞群
1.&苍产蝉辫;清洗所有笔2新生鼠的大脑皮层；
2.&苍产蝉辫;把大脑皮层剪成小块；
3.&苍产蝉辫;加入新鲜的顿惭贰惭飞补苍全培养基4-5尘濒，吹打10-15次；
4.&苍产蝉辫;用100耻尘的滤器过滤；
5.&苍产蝉辫;离心2500搁颁贵/5尘颈苍/4℃。
叁、种植混合胶质细胞群
1.&苍产蝉辫;一个笔2新生鼠的大脑皮层混合细胞群种到一个罢-75培养瓶中；
2.&苍产蝉辫;第5天，全量换液，之后每3天全量换液。
四、原代小胶质细胞的分离和培养
1.&苍产蝉辫;2-3周，当混合的细胞群长满罢-75培养瓶底；
2.&苍产蝉辫;在37℃以150谤辫蝉的速度摇动罢-75培养瓶2小时;
3.&苍产蝉辫;用移液管从所有罢-75培养瓶中收集培养基，不要破坏培养瓶表面的星形胶质细胞层；
4.&苍产蝉辫;离心2500搁颁贵/5尘颈苍/4℃；
5. 吸取上清液，将沉淀重悬于1 ml小胶质细胞培养基中；
6.&苍产蝉辫;计数；
7.&苍产蝉辫;种植小胶质细胞。
8.&苍产蝉辫;在培养箱中培养。
五、代表性结果
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